少妇与大狼拘作爱性A片,久久久久久A亚洲欧洲AV,国产AV无码免费一区二区,一炕四女被窝交换啪啪

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

常見問題FAQ

Q: CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖和毒性的優(yōu)點(diǎn)有哪些?

A: A: CCK- 8較傳統(tǒng)的MTT法優(yōu)點(diǎn)在于

1) MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫還原酶還原成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解而CCK- 8產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟，

2)CCK-8檢測(cè)靈敏度更高，更加穩(wěn)定;

3)酚紅和血清對(duì)其測(cè)定無明顯影響;

4)不必去上清，不必洗,滌細(xì)胞更加簡(jiǎn)便;

5)對(duì)細(xì)胞無明顯毒性，加入顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板使檢測(cè)時(shí)間更加靈活，而且不影響細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

Q :在做細(xì)胞的加藥實(shí)驗(yàn)時(shí)，藥物對(duì)CCK-8測(cè)定是否有影響?如何解決?

A: 1)注意如果藥物具有還原性(如維生素C)，會(huì)和CCK-8發(fā)生顯色反應(yīng)增加吸光度。

2)藥物中的金屬對(duì)CCK-8顯色有影響:當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氧化鐵、硫酸銅會(huì)抑制5%,15%, 90%的顯色反應(yīng)使靈敏度降級(jí)。如果終濃度是10mM的話，將會(huì)100%抑制。解決辦法:首先要確認(rèn)藥物是否有吸收,在含有藥物的培養(yǎng)基中加入CCK-8,測(cè)定450nm的吸光度如果它的吸光度比不含藥物的培養(yǎng)基(加CCK-8)的吸光度高，則證明藥物有影響，可在加CCK-8之前更換培養(yǎng)基，去掉藥物的影響。

3) 由于培養(yǎng)基中可能含有氧化還原反應(yīng)的物質(zhì)，在正式實(shí)驗(yàn)之前建議使用一一個(gè)孔作-一 下檢測(cè)，有必要先確認(rèn)培養(yǎng)基和CCK-8是否反應(yīng)。-般正常的0D值應(yīng)該在0.4以下。

Q: CCK-8如何設(shè)定空白對(duì)照?

A :在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入CCK-8.培養(yǎng)-定的時(shí)間，測(cè)定450nm的吸光度即為空白對(duì)照。 在做加藥實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn))時(shí)，還應(yīng)考慮藥物的吸收可在不含細(xì)胞.加入藥物的培養(yǎng)基中加入CCK-8,培養(yǎng)-定的時(shí)間，測(cè)定450nm的吸光度作為空白對(duì)照。

Q: CCK-8對(duì)于不同的細(xì)胞，靈敏度是否-樣?

A:不一樣,懸浮細(xì)胞較貼壁細(xì)胞難染色。對(duì)于貼壁細(xì)胞,一般加入CCK 8培養(yǎng)1-4小時(shí)吸光度已經(jīng)很高，但對(duì)于懸浮細(xì)胞則可能吸光度較低，可以通過延長(zhǎng)CCK-8的加入時(shí)間或增加細(xì)胞數(shù)量來解決。

Q :可否采用CCK-8法進(jìn)行腫瘤細(xì)胞的基質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)?

A :可以，以層粘連蛋白(Ln)包被96孔板通過計(jì)算不同時(shí)間點(diǎn)孔板中貼壁細(xì)胞的數(shù)量反映細(xì)胞的黏附性。細(xì)胞的黏附性越強(qiáng)，則單位時(shí)間內(nèi)貼于鋪有L n板底的細(xì)胞數(shù)量越多去除尚末貼壁的細(xì)胞后,應(yīng)用CCK-8等方法計(jì)量細(xì)胞數(shù)量便可間接反映不同細(xì)胞或不同處理的細(xì)胞黏附能力的差異。

Q :可否采用CCK-8法進(jìn)行藥物的IC50檢測(cè)?

A :可以，將細(xì)胞培養(yǎng)后按照不同濃度的藥物處理定時(shí)間后進(jìn)行CCK-8檢測(cè)，根據(jù)吸光度繪制曲線，計(jì)算該藥物抑制細(xì)胞數(shù)量一半時(shí)的濃度(IC50)。

參考文獻(xiàn)

1. Ishiyama M, Miyazono Y, Sasamoto K, et al. A highly water-soluble disulfonated tetrazolium salt as a

chromogenicindicator for NADH as well as cell viability. Talanta 1997.44(7): 1299-1305.

2. Ishiyama M, Tominaga H, Shiga M, et al. A combined assay of cell viability and in vitro cytotoxicity

with a ，highlywater-soluble tetrazolium salt,

neutral red and

crystal violet.Biol Pharm Bull

1996, 19(11):1518-1520.

更多病理學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)內(nèi)容詳情請(qǐng)咨詢上海研謹(jǐn)生物!
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢?cè)斦劊覀儠?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或聯(lián)系我司工作人員!

從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù)，協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十余年，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：