免疫膠體金銀細胞化學染色的固定劑選擇 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細介紹 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
免疫膠體金銀細胞化學染色的固定劑選擇 免疫膠體金銀染色和其它免疫細胞化學方法一樣,要想得到好的染色效果,關鍵取決于標本處理是否合適,只有使抗原性及組織結構保存的好,才能使以后的染色成功成為可能,其次要用高特異性和價的一抗,選擇合適的稀釋度。由于免疫組化方法廣泛應用于不同的生物學科,所要檢出的抗原種類繁多,性質也各不相同。因此,不可能有一種適用于所有抗原的固定劑,而是根據不同的抗原性質區別對待。根據我們使用的固定劑介紹如下,供參考。 一、固定劑的選擇及固定時間(詳見表5-9) (1)Karovsky's 液pH7.3。 (2)PAP液(Periodate—lysine – paraformaldehyde fixative) 配制見附錄一。 表5-9 各種抗原固定劑的選擇及固定時間
二、切片的處理與粘附。 免疫組化染色過程較長,洗的次數很多,而且均在振蕩洗滌,抗原片附貼不緊,往往在zui后的時刻,還沒有等顯色就會脫落導致前功盡棄,這個環節 雖小卻會影響大局,因此,為了保證切片染色成功必須把切片處理好,解除掉片的后顧之憂 |