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蛋白印跡膜再生液實(shí)際操作技巧和注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):6954 更新時(shí)間:2021-03-17

蛋白印跡膜再生液說明書

Stripping Buffer

目錄號(hào):K0056

保存條件:室溫(15-25℃)保存。

 規(guī)格說明

 Cat. No.  K0056      K0056A

Volume     100 ml      500 ml   

 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

  本產(chǎn)品采用溫和洗滌配方,可在不影響目的蛋白的情況下,去除結(jié)合在印跡膜上

的一抗和二抗,使同一張膜可進(jìn)行多次抗體檢測(cè),無需反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜,節(jié)省樣品和

時(shí)間,適用于使用NCPVDF膜進(jìn)行Western Blot檢測(cè)時(shí)條件的優(yōu)化或同一樣品不同蛋

白的檢測(cè)。

 本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途    

 注意事項(xiàng)

 1.建議先檢測(cè)表達(dá)量較低的目的蛋白,用再生液處理后檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白,如內(nèi)參蛋白等。

2.請(qǐng)佩戴手套操作。

 操作步驟

 1.將曝光后的膜取出,加入適量的再生液(再生液充分覆蓋膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15  ml左右再生液),室溫振搖孵育15分鐘左右(孵育時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同的目的蛋白來調(diào)整:比如內(nèi)參抗體等表達(dá)量較高的蛋白,使用再生液時(shí)可以延長(zhǎng)孵育時(shí)間至1小時(shí)或者在37℃孵育30分鐘)。

2.棄去再生液,用15 ml緩沖液(PBSTTBST)洗膜3次,每次5 分鐘,室溫振搖。

3.為了檢測(cè)酶標(biāo)二抗洗脫是否*,此時(shí)可以用顯色方法來確定二抗是否洗脫掉。

4.待檢測(cè)完畢,確認(rèn)膜上無殘留的酶活性,再生后的膜通過加入15 ml的封閉液進(jìn)行封閉,室溫30分鐘或者4℃封閉過夜。

5.重新加入待測(cè)一抗,進(jìn)行下一輪的WB實(shí)驗(yàn)。

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 

WB代做

HE染色

免疫熒光染色

蛋白相互作用分析

ELISA免費(fèi)代檢測(cè)

免疫組化

熒光定量PCR

番紅O固綠染色

流式細(xì)胞檢測(cè)

激光共聚焦

透射電鏡服務(wù)

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀(Co-IP

DNA甲基化

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測(cè)序

半定量RT-PCR

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

原位雜交(FIsh

石蠟/冰凍切片

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8檢測(cè)

蛋白雙向(2-D)電泳

蛋白雙向2D-WB

ATP/ADP檢測(cè)

Taqman探針

細(xì)胞劃痕

基因組DNA提取

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)